霍乱为什么被定为甲级传染病?霍乱的检测方法又有哪些?
据央视新闻报道,7月9日晚,武昌区疾控中心接医院报告,武汉大学出现一例感染性腹泻病例,以呕吐腹泻为主,伴低热,血清学凝集试验为O139阳性。经省市区**疾控中心复核,该病例的血清学凝集试验为O139阳性,诊断为霍乱,毒力基因阴性。患者经有效诊治,病情已得到控制,症状已消失。武昌区卫生健康局已组织专业机构对相关人员进行采样检测和**管理,对相关场所进行临时封控管理和消毒处置,目前未发现新增病例。
下面小V就带大家看看,霍乱究竟是什么?
一、霍乱
霍乱(英语:Cholera),又称虎疫、霍痢拉、虎列拉、虎列剌等,是由霍乱弧菌的某些致病株感染小肠而导致的急性腹泻疾病[1]。在我国霍乱被列为甲类传染病,一般在接触病原体后立即发病,症状可能非常轻微,也可能相当严重[2]。霍乱的典型症状为连续数日严重水泻,可能合并有呕吐、肌肉抽搐的现象,所导致的严重腹泻可能造成脱水、电解质失衡甚至死亡,或导致眼窝凹陷、皮肤湿冷且缺乏弹性、发绀,以及手脚出现皱纹等[2-5]。
随着社会的发展,公共卫生及水体质量已得到明显提升,但到目前为止该疾病每年仍然会导致全球约 10 万人死亡。
二、霍乱弧菌
霍乱弧菌是导致人类霍乱的病原体,菌体短小呈逗点状,有单鞭毛、菌毛,部分有荚膜。目前,根据“O”抗原的变异,已鉴定出超过200种霍乱弧菌,其中O1群和O139群可引起霍乱[6]。霍乱弧菌为革兰染色阴性,对干燥、日光、热、酸及一般消毒剂均敏感。正常胃酸可**弧菌,当胃酸暂时低下时或入侵**菌数量增多时,未被胃酸**的弧菌进入小肠,在碱性肠液内迅速繁殖,并产生大量强烈的外**。
这种外**作用在小肠黏膜上可引起肠液的大量分泌,甚至超过肠管再吸收的能力,在临床上出现剧烈泻吐、严重脱水,致使血浆容量明显减少、体内盐分缺乏、血液浓缩,出现周围循环衰竭。
图1. 霍乱弧菌3D图示
三、流行与传播机制
地球水环境研究证实霍乱弧菌(包括 O1、O139 霍乱弧菌)是地表水(尤其是咸水)正常栖息者与生态学的一部分,霍乱弧菌的天然来源是水环境,通过与浮游生物(桡足类动物、甲壳类动物、藻类等)的共生关系实现其长期存活与繁殖而不丢失毒力[7-10]。
病人和携带者是霍乱的传染源,通过粪便连续排菌而污染环境,病人每天的排菌量较大,携带者粪便含菌量较低。病人和携带者的粪便污染水源、食物、环境后可发生水源性、食源性或密切接触性传播。地表水以及海、水产品的带菌或污染是霍乱传播的主要媒介[11-12]。
四、霍乱检测方法
对于霍乱患者的检查,除了血常规、尿常规和血清检查来辅助诊断外,最重要的还是对病原菌进行检查[13]。现在临床上对霍乱弧菌检测的方法包括分子生物学检测和微生物学检测。
分子生物学检测:
▋▎聚合酶链式反应(PCR)
近年来运用PCR的方法来诊断霍乱越来越广泛。通过qPCR技术识别霍乱弧菌**基因亚单位CtxA和**协同菌毛基因(TcpA),进而区别霍乱菌株和非霍乱弧菌。可在4小时内得到检测结果,达到高效检测霍乱弧菌的目的。
PCR检测霍乱弧菌,不仅特异性强,而且简便、快速、灵敏,可大大提高检出率,保证了患者可以得到及时准确的治疗方案。
▋▎基因芯片
基因芯片也称为“生物芯片”,可根据固定在基质上的分子探针的类别分为蛋白质芯片、碳水化合物芯片和基因芯片等。特别是基因芯片,已成为当前生物检测的重要分析工具,它们均基于核酸探针与其互补靶标之间的特异性杂交形成稳定的双链体或三链体。
由固定在固体基质上的数千种功能化探针组成的基因芯片是一种综合分析设备,已被引入生物化学和医学诊断等多领域,并且与PCR 相比,可提供准确、高通量的平行分析。
▋▎环介导等温扩增技术(LAMP)
LAMP 是Notomi 等开发的基于核酸的检测方法的另一种变体。该方法的独特之处是在 60–65 °C 的等温条件下进行扩增,因此省略了对热循环仪的需要。与其他 PCR 检测方法相比,LAMP 被证明更具特异性和灵敏性。使用 LAMP 检测霍乱弧菌的 ctxA 基因,最低检测限达到每个反应 1.4 CFU,比普通 PCR 高近 10 倍,说明该方法具有很高的灵敏度。同样地,这种技术被开发用于检测各种海鲜中副溶血性弧菌 TLH和 groEL 基因。
由于 LAMP 技术涉及到的引物设计相对复杂,容易出现假阳性结果,同时阳性结果依靠人为肉眼判断,存在个人差异,不够客观,因此虽然 LAMP 技术简便、快速、特异性强且不需要特殊的试剂和仪器,但它的缺点使其很难应用于基层。
微生物学检测:
▋▎细菌培养
所有疑似霍乱患者在使用抗菌药物前留下粪便,并尽快送到实验室进行培训。使用碱性蛋白胨水在36℃~37℃培养6~8小时后表面能形成菌膜。进一步对菌膜进行分离培养,再进行动力观察和制动试验。
虽然微生物学检测的灵敏度和特异性较好,但是容易受到环境、培养条件、*作人员主观因素的影响,并且耗时较长,不能满足疾病防控快速反应体系的需求,也不利于临床的快速诊断。
【参考文献】
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[12]王树坤,吴强,杨汝松,姚颖波,刘红雁.霍乱的研究进展和预防控制[J].我国微生态学**,2009,21(07):667-669.DOI:10.13381/j.cnki.cjm.2009.07.024.
[13]方微微, 王恒樑, & 李晓晖. (2019). 霍乱弧菌检测技术研究进展. 微生物学报(10), 9.
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